1 原理

大豆經(jīng)粉碎后與硫酸和催化劑一同加熱消化,使蛋白質(zhì)分解的氨與硫酸結(jié)合成硫酸銨。然后加堿 蒸餾使氨游離, 用硼酸吸收后, 再以鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液滴 定, 根據(jù)鹽酸消耗量計(jì)算蛋白質(zhì)含量。

2 方法簡(jiǎn)述

大豆粉碎后, 稱(chēng)取約0.2g消化。消化結(jié)束后, 使 用FOSS 2300自動(dòng)凱氏定氮儀進(jìn)行測(cè)定。

3 數(shù)學(xué)模型 X(%)=(V-V0) m × CHCl× 14× P× REP× 100 式中: X──樣品中蛋白質(zhì)的含量, %; V──樣品消耗HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積, mL; V0──試劑空白, mL; M──試樣的質(zhì)量, g; CHCl-HCl──標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度, mol/L; P──蛋白質(zhì)換算系數(shù), 這里采用6.25; REP──總重復(fù)性因子。 各分量相互獨(dú)立, 得出X的相對(duì)合成標(biāo)準(zhǔn)不確定 度傳播率為: ur(X)= ur2(V-V0)+ur2(CHCl)+ur2(m)+ur2(REP) "

4 各標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量的評(píng)定

4.1 滴定體積(儀器誤差)的不確定度 儀器自動(dòng)滴定, 滴定體積(V-V0)帶來(lái)的不確定度 儀器已給出, 為0.1%, 按正態(tài)分布考慮, k=3。測(cè)得 蛋白質(zhì)的平均值為38.52%, 則: u(V-V0)=0.1 3 =0.0333 ur(V-V0)=0.0333 38.52 =0.000864 4.2 HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液的不確定度 根據(jù)GB/T 601-2002進(jìn)行HCL標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置及 標(biāo)定, 其數(shù)學(xué)模型為: CHCl=mNa2CO3× 1000× PNa2CO3 VHCl× MNa2CO3 × rep 式中: CHCl-HCl──標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度, mol/L; mNa2CO3──稱(chēng)取Na2CO3的質(zhì)量, g; PNa2CO3──Na2CO3的純度, %; VHCl──滴定消耗的HCl體積, mL; MNa2CO3──Na2CO3的摩爾質(zhì)量, g/mol; rep──標(biāo)定總重復(fù)性因子。 

討論

不確定度的評(píng)定可以判斷出哪些分量對(duì)總不確 定度的貢獻(xiàn)突出, 故可以對(duì)該分量采取措施, 降低 總不確定度。在本文中, 由滴定體積(儀器誤差)、 HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液、稱(chēng)量樣品和總重復(fù)性的不確定度分量 各占分量總和的21.1%、31.7%、21.9%和25.3%, 這 四個(gè)分量中并沒(méi)有哪個(gè)分量影響突出, 可見(jiàn)這四個(gè) 部分對(duì)結(jié)果的準(zhǔn)確性都有影響。