肉、魚、蛋及其制品含有豐富的蛋白質(zhì)等多種營(yíng)養(yǎng)成分, 它們既是人類的高級(jí)食品, 又是細(xì)菌的良好培養(yǎng)基。 如果這些食品在加工、存放或運(yùn)輸過(guò)程中被細(xì)菌污染, 再加上酶的作用, 其中的蛋白質(zhì)便分解產(chǎn)生氨和胺類物質(zhì), 而氨和胺類在堿性條件下均具有揮發(fā)性, 故稱為揮發(fā)性鹽基氮 [ 1] 。 揮發(fā)性鹽基氮是肉、魚、蛋類中食品鮮度等級(jí)的重要指標(biāo)。 而國(guó)標(biāo)中常用半微量定氮法。 但該法蒸餾、定氮過(guò)程十分繁瑣, 反應(yīng)池蒸汽出口易堵塞, 引起倒吸, 而且每測(cè)定一個(gè)樣品需要用稀酸清洗反應(yīng)池。 我們?cè)谧詣?dòng)凱氏定氮儀測(cè)定食品中蛋白質(zhì)基礎(chǔ)上, 摸索出一套自動(dòng)蒸餾、滴定及計(jì)算的新方法。

1　 材料與方法

1.1　 儀器與試劑 　 KDN-19A 凱氏定氮儀(上海纖檢儀器有限公司), 帶750ml 蒸餾瓶;②氧化鎂懸浮液(10 g/ L);③含溴甲酚綠和甲基紅指示劑的 1%硼酸吸收液, 稱取 100 g 硼酸溶于 10 L 純水中,添加 1 g/ L 的溴甲酚綠乙醇溶液 100 ml 和 1 g/ L 甲基紅乙醇溶液 70 ml;④鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.1 mol/ L。

1.2　 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1　 原理　 揮發(fā)性鹽基氮在弱酸性條件下被蒸餾出來(lái), 硼酸溶液吸收, 用鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行滴定。 根據(jù)消耗鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的用量, 求出樣品中揮發(fā)性鹽基氮的含量。

1.2.2　 測(cè)定方法 [ 2]

1.2.2.1　 樣品處理　 準(zhǔn)確稱取絞碎的肉類 10 g 于 750ml管中,加入 100 ml純水, 浸泡 30 min。

1.2.2.2　 儀器操作條件　 receiver　 (30 ml);water　 (50 ml);al-kall　 (0 ml);mode delay ;time 12 s;distillation volume;tubedrain no。

1.2.2.3　 測(cè)定 　 在浸泡好的樣品瓶中加入 10 ml 氧化鎂懸浮液, 迅速放進(jìn)自動(dòng)定氮儀上, 關(guān)上安全門, 儀器自動(dòng)蒸餾、吸收、滴定和計(jì)算。

2　 結(jié)果

2.1　 加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)　 揮發(fā)性鹽基氮所測(cè)定的動(dòng)物食品中的蛋白質(zhì)在腐敗過(guò)程中經(jīng)分解所產(chǎn)生的氨及胺類等堿性含氮物, 使用硫酸胺作為檢驗(yàn)蒸餾器回收率的標(biāo)準(zhǔn)試劑進(jìn)行加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn), 回收率在 97.9%～ 102.3%, 符合檢測(cè)要求。

2.2　 精密度實(shí)驗(yàn)　 取不同的肉類樣品, 分別平行測(cè)定 6 次, 測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在 2.5～ 5.0 之間, 見(jiàn)表 1。

2.3　 不同方法的比較　 對(duì)同一樣品, 分別采用本方法與半微量定氮法相比比較, 兩種方法結(jié)果經(jīng) t 檢驗(yàn), 測(cè)定結(jié)果差異無(wú)顯著性(P>0.05)

3討論

肉類取樣量一般 10 g 左右, 較新鮮的的樣品可在 <20 g 左右, 適量的鹽酸滴定量能減少誤差。 冷凍的樣品必須在解凍后4 h 之內(nèi)打碎攪拌取樣分析。 臨蒸餾前應(yīng)迅速地加入氧化鎂混懸液 10 ml進(jìn)行分析。

鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液的濃度選在0.100 0左右, 使凱氏定氮儀既適用于蛋白質(zhì)的測(cè)定, 又適合揮發(fā)性鹽基氮的測(cè)定, 系統(tǒng)不必更換標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度, 減少了操作和不必要的交叉污染。

采用自動(dòng)定氮儀測(cè)定肉制品揮發(fā)性鹽基氮, 一份樣品大約需要 5 min, 適用大批量樣品的測(cè)定, 結(jié)果精密度高、準(zhǔn)確性好、回收率高, 方法簡(jiǎn)便、快速值得推廣使用。